Billig Kaufen Soltau (Lower Saxony): Filagra との相乗化合物

相乗栄養化合物、LLCおよびNANOTOKINの製品情報への駆動方向が提供されます。 NANOTOKINは4778 N 300 Wの相乗的栄養化合物、LLCによって作成された製品であり、SUITE 120プロボ、ユタ州、84604. NANOTOKINアンチリンクルクリームに関連した製品です。アンチリンクルクリーム。しわ最小限に局所顔の使用のための化粧品を。 NANOTOKIN製品は現在、販売のために米国内で販売されています。 NANOTOKINは、化粧品とクリーニング製品の範疇にあります。所有者と接触して取得します。相乗栄養化合物、このNANOTOKINのLLC。またはマップのビジネスのその場所でそれらを参照してください。このNANOTOKINと商品についてのレビューを書きます。あるいは、ライセンス、使用のための法的特派と通信するための要求を提出することによりNANOTOKIN商標の所有者相乗栄養化合物、LLCにお問い合わせ、および/またはNANOTOKINに関する質問。 NANOTOKINの特派E栄養研究、E栄養研究のLLCは、LLCは、1436 E 820 N、オレム、ユタ州84097から5481です。オリーブミル排水からのポリフェノール化合物の相乗抗菌効果 1応用研究所（ハイファの大学と提携）、ガリラヤ協会、POはボックス437、シェファ・アムル20200、イスラエル生物学の2学科、教育の学術アラブ大学、ハイファ33145イスラエル資源・エネルギー技術の3研究所、ミュンヘン工科大学、Schulgasse 16、94315シュトラウビング、ドイツ 2010年9月21日に受信しました。 2011年1月26日に改訂されました。 2011年2月16日受理著作権©2011アハメドTafeshら。これは、クリエイティブ・コモンズのライセンスの下で配布オープンアクセス記事です。これは任意の媒体に無制限に使用、配布、および再生を可能にし、適切に引用されているオリジナル作品を提供しました。ポリフェノールやフェノール化合物は、二次代謝産物広く植物に分布し、オリーブミル廃水（OMW）に見られるのグループです。フェノール化合物と同様にOMW抽出物は、グラム陽性（化膿連鎖球菌と黄色ブドウ球菌）およびグラム陰性菌（大腸菌、肺炎桿菌）に対する抗菌活性について、in vitroで評価しました。最大1000＆＃x2009のの濃度で、単一化合物として試験したときにテストフェノール類のほとんどは、4細菌株に対して有効ではなかったです。＆＃x3bc。 G＆＃x2009の; mLの＆＃x2212の; 1。 400＆＃x2009のでヒドロキシチロソール。＆＃x3bc。 G＆＃x2009の; mLの＆＃x2212の; 1は、4株の完全な増殖阻害を引き起こしました。没食子酸は200で有効であった、と400＆＃x2009; ＆＃x3bc。 G＆＃x2009の; mLの＆＃x2212の、黄色ブドウ球菌に対して1。および化膿連鎖球菌。それぞれではなく、グラム陰性菌に対して。貧溶媒と呼ばOMW画分を粗OMWにエタノールを添加した後に得られました。、ベルバスコシド（7.4＆＃X25;）、およびチロソール（2.6＆＃X25;）;貧溶媒画分のHPLC分析は、この画分は（10.3＆＃のX25）は、主にヒドロキシチロソール含まれていることを明らかにしました。貧溶媒/没食子酸の組み合わせは明らかに低い最小阻害濃度を用いて試験したその100分の50＆＃x2013の; 100 /＆＃x2009; ＆＃x3bc。 G＆＃x2009の; mLの＆＃x2212の; 1は、4株の完全な増殖阻害を引き起こしました。これらの結果は、天然のフェノール成分で増強OMW特定の画分が病原性細菌を制御するために、生物活性化合物の供給源として利用することができることを示唆しています。 1.はじめにオリーブオイル生産のプロセスは、オリーブミル廃水（OMW）のかなりの量の生成を伴っています。 3000万メートルまでOMWの3は、オリーブオイルの処理中に毎年中東諸国で生産されます。 OMWは、急性の環境や生態系の問題[1の数を作成する有機化合物（主にフェノール類）と豊富です。 2]。これまでのところ、オリーブオイルの生産[3]中に生成されたすべての廃棄物には一般に認められた治療法はありません。しかし、OMWを治療するために、いくつかのアプローチは、嫌気性生分解[4を含むことが示唆されています。 5]、菌による解毒[6]、オゾン化[7]、ならびに他の新規バイオレメディエーションとbiovalorisation戦略[3]。オリーブ油のフェノール画分は、2＆＃X25を含みます。残りの98＆＃X25とオリーブの果実の全フェノール含量、の。オリーブミル廃棄物（OMW）で失われている[8]。このように、OMWはまた、生物学的活動の広い配列を持つフェノール類の多様な範囲の潜在豊富な供給源です。 OMW自体は植物毒性です。しかし、それが原因の廃棄物（9）内に存在するフェノール性化合物の抗菌活性を有します。 10]。多くの研究は、これらの化合物は、抗菌、抗ウイルス、及び抗真菌化合物として有効であることが示されている[11＆＃をx2013; 14]。副産物オリーブオイル生産のための新たな用途を見つけるの研究は、特にオリーブが栽培されているとOMWは、[1無駄になっている地域で、経済にも環境にだけでなく、非常に興味深いです。 15]。フェノールおよびポリフェノールは広くオリーブなどの植物の多様性に発生し、多くの植物種[14で守備関数で使用される化合物の多様なグループです。 16]ここで、食物連鎖に入るといくつかの抗菌製品として使用されるいくつかの[16＆＃x2013; 21]。彼らはまた、副作用[23を引き起こす合成薬物を置換するために使用される天然の抗炎症剤[22]を表します。 24]。生物活性化合物に関する調査研究は、25 [単一のフェノール化合物、またはそれらの組み合わせは、異なる細菌株の増殖阻害をもたらしたことを示しました。 26]。 800＆＃x2009のあった; Pの-coumaricとXylellaのfastidiosa株に対するコーヒー酸の両方の最小発育阻止濃度（MIC）は（ブドウ病ピアース＆＃x2019のが原因）。＆＃x3bc。 Mと200＆＃x2009; ＆＃x3bc。それぞれM、[27]。抗菌活性を示したOMWで見つかった化合物は、ヒドロキシチロソール[28]、オレウロペイン及びヒドロキシチロソール[29]、4-ヒドロキシ安息香酸、バニリン酸、およびP-クマル酸であった[30]。例えば、ヒドロキシチロソールなどのオリーブポリフェノールは呼吸器および腸管感染症の原因で両方のグラム陽性およびグラム陰性細菌に対してインビトロでの[31]に作用することが見出されました。最近の研究では、土壌にOMWの添加はリゾクトニアソラニ及びフザリウムソラニ[32]によって引き起こされる土壌病害に対する重大な疾患の抑止性を発揮しました。研究論文の多くは、オリーブ、オリーブオイルの化学組成を扱う発表されています。しかし、唯一のいくつかの研究は、OMW [33]から化合物を単離し、同定することに焦点を当てています。これらの生理活性代謝物、OMWから特にチロソールおよびヒドロキシチロソール、芳香族酸、および共役芳香族酸の単離は、特に、それらの酸化防止剤および抗菌特性[29の非常に興味深いです。 30 34 35]。上記の研究のほとんどでは、OMWまたは合成化合物からの抽出物は、異なる微生物に対して試験した、いくつかはあまり又は全く活性を効果的かつ他人が認められました。現在の研究の目的は、（a）は、重要なヒト病原性細菌に対して効果的な高活性の抗菌フェノール画分を得た簡単かつコスト効率の高いOMW抽出法を開発すること、（b）活性成分（および/またはフェノール化合物）を定義することでしたそのような画分（純粋な化合物を使用して）、及び（c）既知の生物活性化合物およびヒト病原菌に対するOMWフラクションの相乗効果を調べること。 2.材料と方法 2.1。標準とフェノール化合物さらに精製することなく使用したフェノール及び他の基準は、TCI AMERICA、3からアスコルビン酸、チロソール、プロトカテク酸、バニリン酸、カフェー酸、没食子酸、フェルラ酸、およびp - - coumaric酸シグマアルドリッチ社、イスラエルの、ヒドロキシチロソール、ました APINケミカルズ株式会社、英国からの4 - ジヒドロキシACROSの化学物質から酸、及びベルバスコシド。 2.2。細菌の菌株試験細菌株はグラム陽性参照株化膿連鎖球菌（ATCC番号19675）および黄色ブドウ球菌（ATCC番号25923）及びグラム陰性参照株大腸菌（ATCC番号25922）および肺炎桿菌（ATCCなしが含まれています。 700603）。細菌株は、20＆＃X25を含むトリプシン大豆ブロス（TSB）で維持しました。グリセロールおよびx2212で＆＃保存され; 80＆＃XB0; C使用時まで。継代培養を新たに5＆＃x2009に格納されている文化のループの接種による使用前に調製した。一晩37＆＃XB0でmLのTSBとのインキュベーション; C。文化の濁度を0.5マクファーランド標準疾病管理予防抗菌感受性試験のための（センター（寒天ディスク拡散法）を一致させるために、滅菌生理食塩水で調整した（http://www. cdc. gov/ncidod/DBMD diseaseinfo /コレラ/ ch9.pdf）。 2.3。オリーブミル廃水（OMW） OMWは、三相の公知の方法を使用してオリーブオイル抽出によって生成されました。この研究のためにOMWは、近くのオリーブミルプレス（Iksal、ガリラヤ地域、イスラエル）から入手しました。 OMWは、20＆＃X25で処理しました。エタノール（V＆＃x2009の;：＆＃x2009; v）で4＆＃XB0で保存; C使用時まで。総フェノール（TP）は、収集したOMWサンプルのCOD、BOD、およびpH値は、＆＃x201cに従って決定した。水と廃水の検査のための標準的な方法、第20版1998＆＃のx201d。 OMWでTPはフォリン - チオカルト法[36]に従って決定しました。 2.4。貧溶媒の画分の調製貧溶媒は、OMWからポリフェノールを抽出するために、非常にユニークな方法で調製しました。貧溶媒画分は、水性混合物の少なくとも1つの極性有機溶媒（アセトンまたはエタノール）を添加することによって得ました。極性溶媒は、沈殿を引き起こし、したがって、セルロース混合物（フェノール性発色団は、HPLCを用いて同定されなかった）として主に同定された溶液から有機繊維画分を強制します。次のようにこれらの実験を通して使用貧溶媒を調製しました。 4＆＃XB0で保存OMWの1リットル; C 20＆＃X25と。（7000＆＃をx2009; 10＆＃x2009用RPM;分）エタノールを遠心分離し、その後、ワットマン濾紙を（図1）を用いてろ過を行っ。結果として得られる電子OMWは、20＆＃X25と混合有機画分を取得するにはガーゼの二層を通して濾過しました。エタノール（電子OAC）。それは250＆＃x2009の体積になるまで電子OACは、ロータリーエバポレーターを用いて高真空下で濃縮し、ML（C-OAC）。追加の250＆＃x2009の95＆＃X25 mLの。エタノールは、二相（固体沈殿物と液体層）を得、C-OACに添加しました。固相を濾過によって混合物から除去し、液相を40＃XB0で蒸発させた; C生産するためにロータリーエバポレーターを用いて約250＃のx2009; mLの量。蒸発し、95＆＃X25の添加工程と、 OAC画分が残ったから、それ以上の固体（セルロースの混合物）が析出しなくなるまでエタノールを繰り返しました。主にポリフェノール混合物を含む液相は、10.0＆＃x2009を生成するために、高真空下で蒸発させた。（図1）貧溶媒と呼ばれた暗褐色のペーストのグラム。貧溶媒画分を4＆＃XB0で保存した; C、その後、生物学的試験にその抗菌可能性をテストする化合物を同定するために、各化合物のフェノール含有量を定量するために使用されます。抽出物をメタノールに再溶解し、HPLC-PAD技術を用いて分析しました。＆＃x2009の、ミリネックス。その温度は、30＆＃XB0に維持した; C。移動相は、0.1＆＃のX25ました。 0.1＆＃X25対水（A）中の酢酸; 40＆＃x2009の総走行時間のメタノール（B）中の酢酸;分。 5＆＃x2009;分、20＆＃X25特定の溶出条件は、0＆＃x2013のでした。 B; 5＆＃x2013; 10＆＃x2009;分、20＆＃x2013; 70＆＃のX25; B; 10＆＃x2013の; 21＆＃x2009;分、70＆＃x2013; 80＆＃X25; B; 21＆＃x2013; 30＆＃x2009;分、80＆＃X25; B; 30＆＃x2013の; 32＆＃x2009;分、80＆＃x2013; 20＆＃X25; B; 32＆＃x2013; 40＆＃x2009;分、20＆＃X25; B. 流量は1.0＆＃をx2009た;ミリリットル/分であり、注入量は20＆＃x2009ました。＆＃x3bc。 L. 抽出物中の主要なフェノール化合物を同定し、相対保持時間および純粋な標準（シグマ - アルドリッチ社、イスラエル; TCI AMERICA; APINケミカルズ社、UK; ACROS化学物質）のUVスペクトルとの比較によって定量しました。 2.6。抗菌活性滅菌ループで各寒天プレートから5つの同一のコロニーをし、5＆＃x2009を含むチューブに移し;接種は3＆＃のx2013を持ち上げることにより調製したTSB mLの37＆＃XB0で一晩インキュベートし; Cを。各細菌懸濁液の濁度が約含む懸濁液が得られ、0.5マクファーランド標準のものと比較し、光に到達するように調整しました＆＃x2009の; CFU＆＃x2009の; mLの＆＃x2212; 1。各画分/成分または化合物の組み合わせは、96ウェルプレートを使用して三連ウェル中で抗菌活性について試験し、実験を少なくとも2回以上繰り返しました。プレートは、37＆＃XB0でインキュベートした; C 18＆＃x2009のため、H。その後、プレートを、細菌増殖の阻害について視覚的に検査しました。三連のすべての3つのウェルには微生物の増殖がなかった場合に、各治療において、阻害は、陽性と考えられました。別の化合物およびこれらの混合物の抗菌活性は、異なる組み合わせのMICを決定するために、グラム陽性（S. ピオゲネスおよびS. アウレウス）およびグラム陰性菌（大腸菌および肺炎桿菌）に対して試験しました。 MICは、二つの化合物の最も低い組み合わせは、各処理の三つ組のウェルで完全増殖阻害を引き起こしたように決定しました。 3.結果 3.1。貧溶媒画分の単離 OMWは、私たちのガリラヤ地域から得られ、総フェノール6.6を含む我々の実験で使用されるCOD 170.2、BOD 27.5＆＃x2009; G＆＃x2009の; L＆＃x2212; 1。 pHは5.0でした。アンチソルベント画分の単離を容易にするために面倒な抽出法なしで単離しました。ダーク貧溶媒液は、OMW 1リットルから黒/茶色の濃厚なペーストの10.0グラムを与えるために蒸発させました。ペーストの含有量は、HPLC法を用いて同定し、（他の未確認のピークに加えて、ヒドロキシチロソール、3、4-ジヒドロキシフェニル酢酸、チロソール、ベルバスコシドプロトカテク酸、バニリン酸、カフェー酸、フェルラ酸、およびp - - coumaric酸から構成されました図2及び図3）。 1000年＆＃x2009に基づいて算出し、これらの化合物の量、;次のようにOMWのPPMの貧溶媒抽出物、およびメインは構成は以下の通りであった。ヒドロキシチロソール（102.9＆＃x2009; ppm）で、ベルバスコシド（73.9＆＃x2009; PPM）、チロソール（26.1 ＆＃x2009の; PPM）、フェルラ酸（15.7＆＃x2009; ppm）であり、p - coumaric酸（14.3＆＃x2009; ppm）である（表1）。

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